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PCR技術的主要步驟

來源: 上海西格生物科技有限公司 >> 進入該公司展臺 2021/11/23 14:28:04 已瀏覽:
導讀:PCR技術的主要步驟

PCR技術的主要步驟如下:

1、dna變性:(90℃-96℃):在熱作用下,雙鏈dna模板的氫鍵斷裂,行程單鏈dna。
2、退火:(60℃-65℃):體系溫度降低,引物與dna模板結合形成部雙鏈。

3、延伸:(70℃-75℃:以dntp為原料,在taq酶的作用下(72℃左右),以dntp為底物,從引物的3′端開始,從5′→3′端延伸,用模板法合成互補dna鏈。

每一個周期都被變性、退火和延長,使dna含量加倍?,F在有些pcr即使taq酶活性不是*的,也能在很短的時間內復制,因為擴增區域很短。

因此,可改為兩步法,即在60℃-65℃同時進行退火和延伸,以減少一次升溫和降溫過程,提高反應速度。


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